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上海和泰实验动物饮用纯水机制无菌水的效果观察

[导读]当前对实验动物所需的无菌水一般采用高压灭菌(121 ℃, 30 min)和纯水机制取。前者高压消毒灭菌彻底, 但耗时耗电;后者制水取水方便, 但对其无菌效果心存忧虑 ,不敢大胆采用。为此, 我们对上海和泰仪器有限公司生产的hitech牌实验动物饮用纯水机进行了无菌水的效果观察 。

随着生命科学的不断发展 , 人们对实验动物的质量要求也愈来愈高, 清洁级以上的实验动物使用量也随之增大。清洁级动物饮用水和屏障系统内环境卫生使用水也要求达到无菌状态 。当前对实验动物所需的无菌水一般采用高压灭菌(121 ℃, 30 min)和纯水机制取。前者高压消毒灭菌彻底, 但耗时耗电;后者制水取水方便, 但对其无菌效果心存忧虑 ,不敢大胆采用。为此, 我们对上海和泰仪器有限公司生产的hitech牌实验动物饮用纯水机进行了无菌水的效果观察 。


1 材料和方法

1.1 实验动物饮用纯水机

型号 master-S30UV上海和泰仪器有限公司。产水量为30L h , 纯水机放置在屏障系统外 ,以便于维修和操作, 其储水量为 200 L 的密闭储水桶放置在屏障系统内 , 纯水机与 储水桶以 PE 管穿墙连接 ,储水桶内置浸没式紫外灯 , 紫外灯 24 h 工作, 储水桶下部有一出水龙头, 供屏障内工作人员使用 。

1.2 培养基

营养琼脂 杭州微生物试剂有限公司, 批号20040805 。硫乙醇酸盐液体培养基 , 杭州微生物试剂有限公司 ,批号 20050428 。肉汤培养基, 北京奥博星生物技术责任有限公司 ,批号20010318 。

1.3 水样的采集[ 1]

以无菌操作方法进行, 将屏障内放置的纯水储水桶的水龙头用酒精灯烧灼消毒后, 将水龙头打开,放水5 min 后 , 用灭菌的三角瓶采集水样, 密闭备用 。

1.4 酸化水的配制

为防止实验动物感染绿脓杆菌等细菌等细菌,一般对清洁级以上的实验动物要求饮用酸化水 。本实验酸化水的配制在超净台内进行 。取部分水样,用盐酸将其调到 pH 3 。密闭备用 。

1.5 纯水的无菌检验

在超净台内用无菌吸管分别吸取 1 mL 检样 ,接种于肉汤培养基和硫乙醇酸盐液体培养基上。37 ℃、48 h ,进行需氧菌和厌氧菌的检验 。

1.6 细菌总数的测定[ 1]

无菌操作法用灭菌吸管吸取 1 mL 检样 ,注入无菌平皿中,再倾注约 15 mL 已融化并冷却到 45 ℃左右的营养琼脂培养基。立即旋摇平皿使检样与培养基充分混匀。每个检样应倾注两个平皿。于 37 ℃、24 h后取出计数 。

2 结果

2.1 无菌检测结果

为了观察纯水机的制水效果 , 我们对新购买的纯水机进行了一次性制水效果的检测, 按照纯水在储水桶中存放时间的不同, 进行了无菌检测 。


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